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耗材專區(qū) | Empore™ C18 96孔板在肽段脫鹽過程中的應用

更新時間:2025-04-11       點擊次數(shù):1007
前言
在蛋白質組學研究中,C18 96孔板被廣泛應用于肽段脫鹽和純化步驟,尤其適用于高通量樣本處理,為下游質譜分析提供高質量樣本。

 

 

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Empore™ C18 96孔板簡介

 

耗材專區(qū) | Empore™ C18 96孔板在肽段脫鹽過程中的應用

Empore™ C18膜式固相萃取96孔板專為高通量固相萃取而設計,板的每個孔內都有一個有效直徑為5.5mm的C18固相萃取膜,固相萃取膜和其上方的預過濾層被壓環(huán)固定到每個孔的底部,預過濾層可有效提高大多數(shù)生物樣品前處理流速。有效直徑是指可用于樣品處理的萃取膜實際使用直徑。標準板的單孔儲液體積為1.2mL,深孔板的單孔儲液體積為2.5mL。如果樣品或試劑的體積超過板的單孔儲液體積,可分批次加液。

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Empore™ C18 96孔板技術優(yōu)勢

 

  • 高通量、低樣本損失、兼容自動化設備。
  • 致密且穩(wěn)定的膜結構消除了散裝填料孔板中存在的溝流和孔洞的問題,數(shù)據(jù)重現(xiàn)性更高。
  • 薄薄的膜結構更易被洗脫,回收率更高。

03


C18 96孔板脫鹽原理

 

C18鍵合相(十八烷基硅烷)通過疏水相互作用吸附肽段,去除鹽分、去垢劑等雜質,隨后用有機溶劑洗脫肽段,實現(xiàn)脫鹽和濃縮。

04


實驗前準備

 

1、材料與試劑
  • CDS Empore™ C18 96孔板(貨號:70-2007-3982-2EA,規(guī)格:6015 C18-SD PLATE, 1.2mL, 1PCS)
  • 緩沖液:

活化/平衡液:0.1%三氟乙酸(TFA)水溶液;

洗滌液:0.1% TFA/5%乙腈(ACN);

洗脫液:0.1% TFA/50-80% ACN(或70% ACN/0.1%甲酸)。
  • 真空抽濾裝置或離心機(適配96孔板)
  • 肽段樣本(酶解后的復雜混合物)

2、板預處理

  • 活化:每孔加入200μL 100% ACN,靜置1分鐘,抽干。

  • 平衡:每孔加入200μL 0.1% TFA,重復2次,確保填料親水化。

05


脫鹽步驟

 

1、上樣

 

 

2、洗滌

 

 

3、洗脫

 

 

4、干燥

 

 

06


關鍵參數(shù)優(yōu)化

 

1、流速控制

 

 

2、有機相比例

 

 

3、樣本載量

 

 


07


應用場景

 

1、質譜前處理

 

 

2、分級洗脫

 

 

3、自動化整合

 

 

 

 

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